Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒 NobleRyder P0040
北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)1、Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒 NobleRyder P0040量大優(yōu)惠，咨詢 ：
北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒 NobleRyder P0040量大優(yōu)惠，咨詢 ：
Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒
試劑盒組成 | 包裝（1000微孔） | 保存 |
Folin酚甲試劑A | 100ml×2 | 2-8℃ |
Folin酚甲試劑B | 5ml | 2-8℃ |
Folin酚乙試劑（1N） | 20ml | 2-8℃ |
PBS稀釋液 | 30ml | 2-8℃ |
BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn) （5mg/ml BSA） | 1ml | -20℃ |
本試劑盒自訂購(gòu)之日起一年內(nèi)有效。本試劑盒用于酶標(biāo)板或者200ul比色皿時(shí)可做1000孔。當(dāng)使用2ml比色皿時(shí)可做100孔，如果是1ml比色皿時(shí)可做200孔。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Folin-酚試劑法包括兩步反應(yīng)：*步是在堿性條件下，蛋白質(zhì)與銅作用生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物；第二步是此絡(luò)合物將Folin試劑還原，產(chǎn)生深藍(lán)色，顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。定量范圍為5～100μg/ml蛋白質(zhì)。Folin試劑顯色反應(yīng)由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外，不同蛋白質(zhì)因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強(qiáng)度稍有不同。
使用說(shuō)明
一，酶標(biāo)儀法
1. 根據(jù)需要量，將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50：1混合，其有效期為24小時(shí)，過(guò)期失效。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取10微升BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至100微升（標(biāo)準(zhǔn)品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加PBS補(bǔ)足到20微升。
3. 將樣品作適當(dāng)稀釋（多做幾個(gè)梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
4. 將配好的Folin酚甲試劑每孔加入200微升，輕輕震動(dòng)，混勻，室溫放置10分鐘。
5. 各孔加入20微升Folin酚乙試劑，迅速混勻，37℃放置30分鐘。用酶標(biāo)儀測(cè)定A650，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。
6. 使用溫箱孵育時(shí)，應(yīng)注意防止因水粉蒸發(fā)影響檢測(cè)結(jié)果。
二，分光光度計(jì)法
如沒有酶標(biāo)儀，可用分光光度計(jì)在離心管中混勻后加入比色皿中比色。步驟如下：
1． 根據(jù)需要量，將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50：1混合，其有效期為24小時(shí)，過(guò)期失效。
2． 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取10微升BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至100微升（標(biāo)準(zhǔn)品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。
3． 取八支（或者更多）5ml離心管，標(biāo)讓號(hào)，按下表加入試劑。
離心管號(hào) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7（樣品管1） | 8（樣品管2） | 9（樣品管3） |
標(biāo)準(zhǔn)蛋白BSA | 0 | 40ul | 80ul | 120ul | 160ul | 200ul | 200ul適當(dāng)稀釋的樣品1 | 200ul適當(dāng)稀釋的樣品2 | …… |
PBS | 200ul | 160ul | 120ul | 80ul | 40ul | 0 | 0 | 0 | 0 |
Folin酚甲試劑 | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml |
混勻，室溫放置10分鐘 | |||||||||
Folin酚乙試劑 | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul |
4．混勻，37℃放置30分鐘。用分光光度計(jì)測(cè)定A650
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū)，是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)、銷售、服務(wù)為一體的生物科技公司，公司主要經(jīng)營(yíng)的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas（MBI）, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等；產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)常用試劑、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器。
Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒 NobleRyder P0040
